談?wù)剼庀嗌V儀內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)和外標(biāo)校準(zhǔn)的操作步驟有哪些
氣相色譜儀是實(shí)驗(yàn)室中蕞為重要,主力的檢測設(shè)備. 每一臺(tái)色譜儀,從方案,選型,到確定配置,都根據(jù)實(shí)際用途做方案,根據(jù)你檢測樣品的特點(diǎn),種類,來選配色譜柱,檢測器,不同檢測方案所用的分析定量方法也不一樣，氣相色譜儀的定量檢測方法一般有歸一化法、內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)三種方法，其各有優(yōu)缺點(diǎn)。下面譜析色譜小編就簡單把外標(biāo)法與內(nèi)標(biāo)法的校準(zhǔn)介紹一下，希望對(duì)您的分析會(huì)有幫助 一、內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)步驟：
1、用此方法時(shí)，分析人員必須選擇一個(gè)或數(shù)個(gè)欲分析化合物的化學(xué)性質(zhì)相似的內(nèi)際物質(zhì)。分析人員必須進(jìn)一步證明內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的測量不受方法或基體干擾的影響。由于這些限制，所以不可能推薦一種可用于所有樣品的內(nèi)標(biāo)物。
2、加一定體積的一個(gè)或數(shù)個(gè)貯備溶液至容量瓶中配制至少5個(gè)濃度水平的各個(gè)欲分析物質(zhì)的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)每一個(gè)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)加已知的恒定量的1個(gè)或數(shù)個(gè)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)。用適當(dāng)溶劑稀釋定容。其中一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的濃度應(yīng)接近但要大于方法的檢測限，其它濃度應(yīng)相當(dāng)于實(shí)際樣品的預(yù)計(jì)濃度范圍。
3、用和實(shí)際樣品欲采用的相同的導(dǎo)入方法（如2～5μl注射量或氣捉及捕集法等等），注射每一個(gè)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。將峰高或峰面積響應(yīng)值對(duì)每一化合物或內(nèi)標(biāo)的濃度列表。計(jì)算每一化合物的響應(yīng)因子（RF）。如果RF值在工作范圍內(nèi)是恒定的（<20% RSD）。則可以假定RF位不變，RF的平均值可以用于計(jì)算?；蛘咭部梢詫⒔Y(jié)果繪制響應(yīng)值比率（As／Ais）對(duì)RF位的校準(zhǔn)曲線。
4、必須在每個(gè)工作日測量一個(gè)或數(shù)個(gè)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)以檢查工作校準(zhǔn)曲線或RF值。檢查的次數(shù)取決于檢測器。如ECD檢測器，在亞納克級(jí)工作范圍時(shí)。由于GC柱和樣品的影響較容易使響應(yīng)值變化，因此需要比較多次的校準(zhǔn)。FID檢測器靈敏度很低，要求檢查的次數(shù)則可少些。如果任一分析物質(zhì)的響應(yīng)值和預(yù)計(jì)的響應(yīng)值的差別大于±15%，必須對(duì)該化合物繪制一新的校準(zhǔn)曲線。
二、外標(biāo)校準(zhǔn)步驟：
1、對(duì)每一欲分析的物質(zhì)。配制至少5個(gè)濃度水平的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。加一定體積的1個(gè)或數(shù)個(gè)貯備標(biāo)準(zhǔn)至容量瓶中，用適當(dāng)溶劑稀釋定容。外標(biāo)中的一個(gè)濃度應(yīng)當(dāng)接近但是要高于方法的檢測限。其它濃度應(yīng)相當(dāng)于實(shí)際樣品中預(yù)計(jì)的濃度范圈或者限定在檢測器的工作范圍。
2、采取欲用于實(shí)際樣品的導(dǎo)至氣相色譜儀的進(jìn)樣技術(shù)。注射每一個(gè)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)（如2～5μl注射樣，氣提及捕集等等）.將峰高或峰面積的響應(yīng)值對(duì)樣品注射量列表。此結(jié)果可用于繪制每一分析物的校準(zhǔn)曲線。對(duì)于用注射器將樣品導(dǎo)入氣相色譜儀的，也可用另一種方法，將響應(yīng)值和注射量的比率定為校正因子（CF），可以在每一標(biāo)準(zhǔn)濃度汁算每一分析物的含量。如果校正因子的百分相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%在工作范圍內(nèi)低于20%，則可以假定為通過原點(diǎn)的直線，校正因子的平均值可以用來代替校準(zhǔn)曲線。
*對(duì)于多響應(yīng)的農(nóng)藥／（PCBs），采用所有用于定量的色譜峰的總面積。
3、必須在每個(gè)工作日用注射1個(gè)或數(shù)個(gè)校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)來檢查確定工作校準(zhǔn)曲線或校正因子。檢查的次數(shù)取決于檢測器。如ECD檢測器在亞納克范圍工作時(shí)，由于GC柱和樣品的影響較易使檢測器響應(yīng)值變化，因此需要更多次的檢查校準(zhǔn)曲線。FID檢測器靈敏度低得多，不需多檢查校正。如果任一分析物質(zhì)的響應(yīng)值和預(yù)計(jì)的響應(yīng)差別大于±15%，則必須對(duì)那種分析物質(zhì)繪制一新的校準(zhǔn)曲線。
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